<NA0531> Blasticidin S (10 mg/ml) 杀稻瘟菌素S (灭瘟素)(10 mg/ml)

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<NA0531> Blasticidin S (10 mg/ml) 杀稻瘟菌素S (灭瘟素)(10 mg/ml)

Blasticidin S (10 mg/ml) 杀稻瘟菌素S (灭瘟素)(10 mg/ml)
NA0531-1ML
NA0531-5ML
NA0531-10ML
品牌:NoninBio
促销: 450.00~3600.00
价格: 565.00~4500.00
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 杀稻瘟菌素S(灭瘟素)(10mg/ml)

Blasticidin S (10mg/ml)

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产品简介:

杀稻瘟菌素SBlasticidin S)是一种分离自灰色链霉菌(Streptomyces griseochromogenes)的核苷肽类抗生素,通过特异性干扰核糖体肽键形成,强效抑制原核与真核细胞的蛋白质合成。本品主要用于筛选携带bsrBSD耐药基因的转染细胞,具有起效迅速、作用强劲的特点,通常一周内即可完成阳性克隆筛选,且极低浓度即可快速杀灭敏感细胞。

本品为溶于HEPES缓冲液(pH7.5)的即用型无菌溶液,浓度10mg/ml。细菌筛选常用浓度为25100μg/ml,哺乳动物细胞筛选常用浓度为150μg/ml。初次实验建议通过杀灭曲线确定最佳工作浓度,以实现筛选效率与成本的最优化。

 

保存条件

-20℃保存(一年有效)

 

产品特性:

1)     同义名:Blasticidin S Hydrochloride; 灭瘟素S盐酸盐; 稻瘟散;

2)     CAS NO.3513-03-9

3)     分子式:C17H26N8O5·HCl

4)     分子量:458.9

5)     纯度:>95%HPLC

6)     化学结构式:

 

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产品使用:

1.     大肠杆菌(E. coli)筛选(推荐浓度:25100 μg/ml

大肠杆菌对Blasticidin S天然敏感性较低,但携带bsrBSD抗性基因的转化子可在低盐LB固体培养基(pH 8.0)中,采用100μg/ml Blasticidin S进行高效筛选。注意:适当提高pH值(至8.0)可显著增强抗生素的筛选活性,提高阳性克隆检出率。

2.     哺乳动物细胞筛选(常用浓度:150μg/ml

哺乳动物细胞系Blasticidin S的推荐工作浓度范围为150μg/ml。由于不同细胞系对抗生素敏感性差异较大,初次实验强烈建议通过杀灭曲线(kill curve)确定最佳筛选浓度,以实现高效筛选并最大限度降低对细胞毒性。

一些哺乳动物细胞的建议工作浓度:

细胞系

培养基

Blasticidin S筛选浓度

CHO

DMEM

5-10μg/ml

HEK293

DMEM

5-15μg/ml

HeLa

DMEM

2.5-10μg/ml

Neuro2a

DMEM

30μg/ml

B16

RMPI

3-10μg/ml

PC1.0

RMPI

10-30μg/ml

THP-1

RMPI

10μg/ml

筛选步骤:

1)转染48h后,用含适宜浓度Blasticidin S的新鲜培养基进行传代培养。
【注】:抗生素在细胞活跃分裂期发挥最佳效应,细胞密度过高会降低筛选效率,传代时细胞汇合度建议控制在25%以内。

2)随后每3–4天弃去旧培养基,加入含相同浓度Blasticidin S的新鲜培养基,持续维持选择压力。

37天后观察并评估细胞克隆形成情况。根据细胞类型及转染/筛选效率,克隆形成时间可适当延长至14天或更久。

4)挑取5–10个抗性细胞克隆转移至35 mm细胞培养皿中,继续用选择培养基维持培养7天,随后可进行细胞活性或功能检测。

  

注意事项:

1.     Blasticidin S为有毒化合物,操作时需注意防护,切勿与身体或皮肤直接接触。

2.     为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

本产品仅用于生命科学研究,不得用于医学诊断及其他用途!

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常用筛选抗生素及其使用浓度:

货号

名称

抗性基因

有效筛选浓度(µg/mL

NHB0003-1G

潮霉素B

Hygromycin B

大肠杆菌潮霉素抗性基因

hyghph

哺乳动物细胞:200-500

细菌/植物细胞:100-300

真菌:300-1000

NA0531-1ML

杀稻瘟菌素S(Blasticidin S

蜡样芽孢杆菌的bsr基因

土曲霉的BSD基因

哺乳动物细胞:1-10

大肠杆菌:25-100

NBS2094-1ml

腐草霉素

Phleomycin

Sh ble基因(Streptoalloteichus hindustanus bleomycin gene

酵母菌:10

丝状真菌:25-150

NBS2095-100mg

NBS2096-125mg

博莱霉素

Zeocin

Sh ble基因(Streptoalloteichus hindustanus bleomycin gene

哺乳动物细胞:50-1000

大肠杆菌:25-50

酵母菌:50-300

NBS2099-1g

遗传霉素

GeneticinG418

Tn601 (903)Tn5来源的新霉素抗性基因(neo

哺乳动物细胞:200-2000

植物细胞:10-100

酵母细胞:500-1000

网柄菌属:10-100

NBS8833-1ml

嘌呤霉素(Puromycin

链霉菌来源的嘌呤霉素N-乙酰转移酶基因(pac

哺乳动物细胞:1-10

大肠杆菌:100-125