Invivogen ant-bl-1  Blasticidin solution（10mg/ml）

Invivogen原装产品，现货供应。

基本介绍：

Blasticidin S（杀稻瘟菌素），也称为稻瘟散，灭瘟素S盐酸盐，从灰色链霉菌Streptomyces griseochromogenes分离到的一种核苷肽类抗生素。

作用机制：主要通过干扰核糖体中肽键的形成来特异性抑制原核和真核细胞的蛋白质合成。

Blasticidin S用于筛选携带bsr或BSD基因的转染细胞。杀稻瘟菌素S具有快速而强效的作用模式，一个星期内完成阳性克隆的筛选，且很低的抗生素浓度便能导致细胞迅速死亡。

抗性基因：

三种杀稻瘟菌素抗性基因已被克隆且测序：一种是乙酰转移酶基因，来自杀稻瘟菌素产生菌的bls基因；另外两种是脱氨酶基因（deaminase genes），分别为来自bacillus cereus蜡样芽孢杆菌的bsr基因，和来自Aspergillus terreus土曲霉的BSD基因。bsr和BSD基因是最主要的选择性标记基因，用于哺乳动物和植物细胞的转基因实验。虽然bsr和BSD基因多用于哺乳动物细胞的筛选标记，但也可以用于E. Coli。

筛选浓度：

A、大肠杆菌（E. Coli）【常用浓度：25-100µg/ml】

E. Coli对Blasticidin敏感性很弱，但含Blasticidin抗性的转化子可在低盐LB固体培养基（pH 8.0），100µg/ml Blasticidin的条件下进行筛选。高pH可增强抗生素筛选活性，为了达到最佳效果，推荐使用Invivogen公司的Fast-Media®Blas培养基联合筛选。

B、哺乳动物（Mammalian Cells）【常用浓度：1-10µg/ml】

哺乳动物细胞系Blasticidin的常用工作浓度范围1-10μg/ml，少数情况高达30μg/ml。初次实验建议通过灭杀曲线来确定最佳使用浓度。

某些细胞系用Blasticidin进行筛选的建议浓度：

实验步骤：

1）Blasticidin S通常使用浓度为1-10μg/ml，初次实验建议通过灭杀曲线来确定最佳使用浓度。

2）转染48h后，用含适宜浓度Blasticidin S的新鲜培养基将细胞传代；（注：细胞处于活跃分裂期时抗生素工作最好。细胞密度太高，抗生素效率降低。分盘时覆盖率最好不超过25%）

3）每3-4天去除培养基，加入含相同浓度Blasticidin的新鲜培养基；

4）7天后检测细胞集落形成。根据宿主细胞种类和转染/筛选效率，集落形成可能需要再增加一周或更久。

5）转移5-10个抗性克隆到35mm细胞培养盘。加入选择培养基维持培养7天，再进行后续实验。

质量控制：

浓度10mg/ml，每一批次都经过严格检测，确保每一批次间产品质量连续稳定。

纯度：≥ 95% (HPLC)
内毒素水平：<1 EU/mg
理化特性：pH7.5, 透明
细胞培养检测：用Blasticidin敏感和Blasticidin抗性哺乳动物细胞系检测产品活性
无细胞毒性痕量污染物：长期培养Blasticidin抗性细胞确认无细胞毒性 

保存：

4°C短期或-20°C长期保存，避免反复冻融。