E-Poly™ DNA/RNA转染试剂

概述

      E-Poly™ Transfection Reagent是一款性能优良的核酸转染试剂，适用于多种细胞的各类DNA、siRNA的高效转染，如HEK293T、HepG2、U87、Hepa1-6、MC38等。具有操作简便、转染效率高、细胞毒性小、重复性好等优势，该试剂转染效果不受血清和抗生素存在的影响，配制的转染复合物可以直接加入完全培养基中，转染前无需更换无血清培养基。

产品介绍：

极简操作流程：

      根据实验需要按顺序混合配制转染复合液：DNA（RNA）溶液（1mg/mL）、Reagent A、Reagent B溶液推荐体积比为1:50:3各组分混匀后，室温孵育20 min后，进行细胞给药。

详实研究数据：

1. 多种细胞内绿色荧光蛋白（GFP）质粒转染效率

      根据实验需要接种细胞过夜，在转染24~48 h后通过荧光显微镜观察GFP表达，根据荧光显微镜下看到的荧光蛋白表达量判断DNA转染效率。结果显示，E-Poly™转染试剂在多种细胞中GFP转染效率显著高于T品牌3000（T-3000）、T品牌2000（T-2000）。

图1.多种细胞内质粒转染效率及绿色荧光蛋白表达量

2. E-Poly™递送siRNA进行基因敲低

      根据实验需要接种细胞过夜，换液后加入siGAPDH转染复合液，转染24 h后测定GAPDH和β-Actin的mRNA表达水平。结果显示，E-Poly™在HEK293T和HepG2细胞上siRNA敲低效率较T-3000更优，但E-Poly™和T-3000的siRNA敲低效率显著低于CALNP™ RNAi in vitro（货号：DN001-10，下面同）转染试剂。

图2.多种转染试剂转染siRNA基因敲减效率比较

3. E-Poly™共转质粒及siRNA

      根据实验需要接种细胞，E-Poly™、T-3000和T-2000组同时反向转染Fluc-质粒及siRNA，24 h后加入荧光素底物测定荧光水平；E-Poly™+CALNP™组采用E-Poly™转染质粒6 h后，换液加入siRNA-CALNP™转染复合液，转染24 h后加入荧光素底物测定荧光水平。结果显示，E-Poly™在HEK293T和HepG2细胞上转染Fluc-质粒蛋白表达效率显著高于T-3000和T-2000，共转siRNA后敲低效率略优于T-3000，显著优于T-2000组；而E-Poly™+CALNP™联用组siRNA用量更低（siRNA：70 nM vs.10 nM），但Fluc基因敲减效率更优。

图3.多种转染试剂共转质粒DNA和siRNA过表达和基因敲减比较

注：T-2000、T-3000及E-Poly™组，si-Fluc-RNA浓度为70 nM；E-Poly™+CALNP™组，si-Fluc-RNA浓度为10 nM