全细胞内参抗体

Anti Hsp90 Antibody-HRP

产品介绍 

Hsp90 属于热休克蛋白家族，其余成员包括Hsp110、Hsp70、Hsp60以及小分子热休克蛋白，家族成员共有一个非常特殊的C型模式与 ATP结合。Hsp90是细胞中含量最丰富的蛋白质之一，分子量约90kDa，对真核生物的生存能力至关重要，Hsp90也是常用的内参抗体 之一。AntiHsp90Antibody-HRP 是通过一定的工艺将辣根过氧化物酶 (HRP) 偶联至Hsp90抗体上，进行WB实验时加入发光液A和B， 一般是鲁米诺和过氧化氢，在辣根过氧化物酶 (HRP) 的催化作用下，鲁米诺与过氧化氢反应生成一种过氧化物，过氧化物不稳定随即分 解，形成一种能发光的电子激发中间体，当后者由激发态返回至基态，就会产生荧光，实现对Hsp90内参蛋白的检测。 

基本信息 

抗体来源：重组抗体 

交叉反应：人、小鼠 

克隆类型：单克隆抗体 

偶联物：辣根过氧化物酶 (HRP) 

纯化方式：rProteinA 亲和纯化 

储存缓冲液：1×PBS(pH7.4) ，0.05%proclin300，50%甘油 

储存条件 

干冰运输，-20℃可保存2年，避免反复冻

产品应用 

WB=1:1000-1:5000

注意事项 

1) 本产品为HRP直标抗体，需要避光保存于-20℃或者-80℃中； 

2) 本产品灵敏度高，WB 稀释比值请按照说明书进行，否则可能会出现非特异性条带； 

3) PVDF 膜在转膜前需要用甲醇激活，转膜后抗体稀释液尽量过量，转膜和抗体孵育过程中不要产生气泡； 

4) 本品在37℃下孵育 30-60min 即可产生很明显的信号，常温孵育可适当延长时间； 

5）本品对人Hsp90蛋白的灵敏度高于鼠Hsp90蛋白。

参考信息 

1) 样本信息：293、Hela和EL4-B5细胞系； 

2) 样品处理：3×106细胞PBS清洗三次后加入1mlPBS重悬，取10μl重悬液加入10μl2×loadingBuffer，100℃高温煮沸10min； 

3) 上样体积：10μl（含2×loadingbuffer）； 

4）抗体稀释比值：5ml抗体稀释液中加入1μl（1：5000）和5μl（1：1000）AntiHsp90Antibody-HRP抗体； 

5) 抗体孵育条件：37℃摇晃孵育30min；