HS Universal qPCR Master Mix
产品编号 | 产品名称 | 包装规格 |
NBS0014-5ml | HS Universal qPCR Master Mix | 5*1 mL |
产品简介:
本产品是一款使用SYBR Green Ⅰ嵌合荧光法进行 qPCR反应的专用预混液。核心组分 Hot-start Taq 是基于抗体法修饰,搭配针对 qPCR系统优化的最适 Buffer,显著提高了扩增特异性和低拷贝基因的检测灵敏度,能够在宽广的定量范围内得到优异的扩增线型,对靶基因进行准确定量、检测,重复性好,可信度高。本产品是一款 2 ×预混液,只需额外加入引物、模板即可,使用方便。
图1所示,以Hela细胞为CDNA模板,使用HS UniversalaPCR Master Mix和其他品牌的产品,在同等条件下扩增相同的基因。实验结果显示,NoninBio品牌的HS Universal gPCR Master Mix 扩增效率更高,荧光强度更强,可以获得更高的扩增平台值。
图2所示,以Hela细胞转录组cDNA为模板,使用HS UniversalqPCR Master Mix,ROX plus和其他品牌的产品,在同等条件下扩增相同的基因,实验结果显示,NoninBio品牌的HS Universal qPCRMaster Mix,ROX plus相对其他品牌,扩增效率更高,荧光强度更强,溶解曲线更集中尖锐。
实验流程:
配置如下 PCR 反应体系:
成分 | 体积 |
2 × HS Universal qPCR Master Mix | 10 μL |
Primer F(10 µM) | 0.4 μL |
Primer R(10 µM) | 0.4 μL |
Template DNA | X μL |
ddH 2O | Up to 20 μL |
表 1. HS Universal qPCR Master Mix 反应体系
建议 PCR 程序:
温度 | 时间 | 循环数 | |
预变性 | 95℃ | 30 sec~3 min | 1 Cycle |
循环反应 | 95℃ | 10 sec | 40 Cycles |
55-60℃ | 10~30 sec | ||
溶解曲线 | 95℃ | 15 sec | 1 Cycle |
60℃ | 60 sec | ||
95℃ | 15 sec |
表 2. HS Universal qPCR Master Mix 反应程序
注:95℃ 30 sec 该预变性条件适合大多数扩增反应,如模板结构复杂,GC含量高,可将预变性时间延长至3 min,以提高预变性效果,同时酶活可以更高程度释放,得到更好的实验结果。
注意事项:
1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。