Trypsin (from Bovine), TPCK Treated 牛来源胰蛋白酶
产品简介:
胰蛋白酶(胰酶,Trypsin),CAS:9002-07-7,来源于胰腺的一种丝氨酸蛋白酶,由223个氨基酸残基组成的单链多肽,底物特异性是带正电荷的赖氨酸和精氨酸侧链。胰酶主要切割赖氨酸和精氨酸羧基端,当两者之一紧随为脯氨酸的情况除外。另外,当切割位点任一边紧邻酸性残基,胰酶水解速率也会减缓。 胰蛋白酶(胰酶,Trypsin),以无活性的胰蛋白酶原(Trypsinogen)形式分泌于胰腺中,通过切割其末端六肽而得到活化,产生天然单链形式的β-胰酶(β-Trypsi n),随后进行有限的自发裂解产生具水解活性的α-Trypsin(由二硫键共价连接的二条肽链组成)。胰酶水解活性可被多种化合物所抑制,有1)来源于胰腺、大豆、青豆、蛋清的天然胰蛋白酶抑制剂;2)银离子;3)有机磷化合物,如氟磷酸异丙酯DFP;4)特定蛋白酶抑制剂,如AEBSF、抗蛋白酶、抑肽酶、PMSF、TLCK等;本品是来源于牛胰腺的胰蛋白酶,经N-(对甲苯磺酰基)-L-苯丙氨酰甲基氯酮(TPCK)预处理以抑制任何残留的糜蛋白酶活性,具更高的胰蛋白酶活性。本品以冻干粉形式提供,比活力≥10,000 BAEE units/mg。
产品特性:
1)EC NO:3.4.21.4
2)CAS NO:9002-07-7
3)同义名:Trypsin, from bovine pancreas, TPCK Treated; 胰酶,来源于牛胰腺,TPCK处理;
4)分子量:23.8 kDa
5)外观:类白色或微黄色结晶粉末
6)溶解性:溶于1mM HCl(1mg/ml)
7)比活力(胰蛋白酶):≥10,000 BAEE units/mg
8)比活力(糜蛋白酶):≤0.1 BTEE units/mg
9)级别:测序级胰酶
使用方法:
1.产品溶解
储存液制备:溶于1mM HCl(pH 3)配制母液,充分溶解,-20℃分装冻存,至少稳定保存~1年。加入Ca2+(20mM)能延缓胰蛋白酶的自溶和维持胰蛋白酶在溶液内的稳定性。
稳定性:胰蛋白酶在2.0M尿素,2.0M盐酸胍或0.1%(w/v)SDS维持绝大多数活性。在高pH(>11)下不可逆变性,或添加三氯乙酸 (TCA,终浓度10%)沉淀样品,或加入高浓度尿素(>6.5M)变性。
为了去除所有胰蛋 白酶活性,在1%(w/v)SDS下于100℃至少加热5min。
2.产品用法
使用时,将储存液稀释在50mM NH4HCO3 pH 7.8或pH7~8的合适缓冲液内(根据具体用途来选择稀释缓冲液)。
注意事项:
1)胰蛋白冻干粉产品常遇到的活性定义及其转换:
1 BAEE Unit:在25℃,pH 7.6的条件下,以BAEE为底物,3.2 ml的反应体系中,A253吸光值每分钟会发生0.001的变化即为一个酶活单位。
1TAME Unit:在25℃,pH 8.2,0.001M Ca2+条件下,每分钟水解1μmolp-toluenesulfonyl-L-arginine methyl ester(TAME)的用量。
1 USP Unit:在指定条件下,每分钟引起吸光值发生0.003的变化的样品活性。
1 TAME unit = 19.2 USP or NF units = 57.5 BAEE Unit
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存与运输方法:
保存:-20℃密封干燥保存,至少2年有效。
运输:冰袋运输。