Polybrene (10mg/ml) 聚凝胺 (10mg/ml)

货号：NBS2554-1ml；

NBS2554-5ml

品牌：NoninBio

基本介绍：

Hexadimethrine Bromide，中文名海（地）美溴铵，CAS：28728-55-4，一种多聚阳离子聚合物，广为人知的一种抗肝素剂（肝素拮抗剂），归于其中和红细胞表面净负电荷的能力，常用来产生红细胞的非特异性凝集。利用凝聚特性，也提供了一种准确、快速和简单的方法用来体外测定肝素活性。自动化测序分析小剂量的海美溴铵可明显改善多肽的降解现象，因其加入提高PVDF膜的亲水性，减低测序过程中多肽的机械损失。海美溴铵能够增强脂质体转染效率，常常用在哺乳动物细胞的DNA转染实验。比如，可转染低分子量质粒DNA进入细胞系（如CHO），这种细胞用其他方法如磷酸钙共沉淀转染相对比较难。也常用于逆转录病毒、慢病毒介导的基因转染。作用原理可能在于能够中和细胞表面唾液酸与病毒颗粒之间的静电排斥和增强受体不依赖的病毒吸收，来增强病毒的感染效率。

本品为无菌溶液，浓度为10mg/ml，使用时一般按1:1000-1:2000稀释，依细胞种类不同稀释比例不同，具体查阅相关文献或根据实验室经验来调整。

基本特性：

1）CAS：28728-55-4

2）同义名：Hexadimethrine Bromide; 1,5-Dimethyl-1,5-diazaundecamethylene polymethobromide;

3）纯度：≥94% (titration)

4）浓度:10mg/ml in H₂O，无菌

5）化学结构式：

保存与运输方法：

保存：-20℃冻存二年稳定。

运输：冰袋运输。

常见筛选浓度：

Polybrene（聚凝胺）是海（地）美溴铵（Hexadimethrine Bromide）液体制品的商标名，是一种非常有效的基因转染增强剂。用于病毒介导细胞转染常用浓度为8µg/ml，具体浓度依细胞类型会有差异，可参阅文献或梯度实验摸索。

Polybrene用于转染增强剂，已经成为全球各大实验室和各种基因转染服务机构最通用的方法之一，相比于硫酸鱼精蛋白（Protamine sulfate，CAS：98001-69-5）和其他阳离子的使用普遍率更高更广泛。发表的文献至少上万篇。

参考使用浓度【文献来源】：

1）用表达H-rasV12或小鼠Trop2基因的慢病毒感染新鲜制备的小鼠皮肤角质细胞（Keratinocytes），使用含4 μg/ml polybrene的培养基孵育48h。之后收集细胞。

文献：Wang J, et al. Loss of Trop2 Promotes Carcinogenesis and Features of Epithelial to Mesenchymal Transition in Squamous Cell Carcinoma. Mol Cancer Res. 2011 Dec;9(12):1686-95.

2）用ATF3 shRNA慢病毒颗粒感染6孔板培养的HepG2细胞，加入含10 μg/ml polybrene的培养基孵育24h，polybrene用来增强慢病毒转导效率。用嘌呤霉素（10μM）筛选阳性转导细胞株。

文献：Weng S, et al. Niclosamide induced cell apoptosis via upregulation of ATF3 and activation of PERK in Hepatocellular carcinoma cells. BMC Gastroenterol. 2016 Feb 25;16:25.

3）用TLR10 shRNA慢病毒颗粒感染THP-1细胞，细胞先于polybrene（8 μg/ml）混合后，将病毒加入细胞，病毒感染复数（MOI）为10。24h之后更换不含polybrene的新鲜培养基。用嘌呤霉素（1 μg/ml）筛选阳性克隆株。

文献：Le HV, et al.Stable Toll-Like Receptor 10 Knockdown in THP-1 Cells Reduces TLR-Ligand-Induced Proinflammatory Cytokine Expression. Int J Mol Sci. 2016 Jun 1;17(6).

4）为提高腺病毒转染效率和LacZ转基因表达，使用6μg/ml Polybrene处理病毒载体后转入BHK-21细胞（MOI为100），转染率提高到95%，没有用Polybrene处理的只有2.3%转染率。

5）NPC细胞（50% confluence）用含5 μg/ml Polybrene的NBF培养基，之后用 ZNF804A shRNA慢病毒颗粒感染细胞；24h后，更换不含polybrene的NBF培养基。24-48h之后，加入嘌呤霉素（5 μg/ml）筛选阳性克隆株。

文献：Chen J, et al. ZNF804A Transcriptional Networks in Differentiating Neurons Derived from Induced Pluripotent Stem Cells of Human Origin. PLoS One. 2015 Apr 23;10(4):e0124597.