Cy5.5 (Cyanine 5.5)

产品简介：

Cy5.5 (Cyanine 5.5) 是一种发近红外（NIR）荧光的花青素荧光染料，常应用于小动物活体体内成像。 Cy5.5可以用来标记蛋白，抗体，多肽，核酸分子，纳米粒等化合物。

产品特性: 

1)     英文别名：Sulfo-Cyanine5.5

2)     CAS No.：210892-23-2

3)     分子量：917.06

4)     分子式：C41H44N2O14S4

5)     溶解度：H₂O: 6.7 mg/mL (7.31 mM)

DMSO: 85 mg/mL (92.69 mM)

6)     化学结构图：

保存条件：

-20℃避光保存，3年有效。

产品使用：

一、体外活性：

原液制备步骤

1. 蛋白准备

1) 为实现最佳标记效果，需将蛋白（抗体）浓度调整至 2 mg/mL。

2) 确保蛋白溶液的 pH 在 8.5±0.5 范围内。若 pH 值低于 8.0，可用 1 M 碳酸氢钠调节。3) 当蛋白浓度低于 2 mg/mL 时，标记效率将显著降低。为优化标记效果，建议蛋白浓度维持在 2-10 mg/mL 之间。

4) 蛋白需溶解在不含伯胺（如 Tris 或甘氨酸）和铵离子的缓冲液中，否则会干扰标记反应。

2. 染料准备

使用无水 DMSO 配制Cy5.5 染料，浓度为 10 mM 的储备液。通过玻璃棒或涡旋混匀.

注意：Cy5.5 染料储备液建议分装后避光保存于-20℃或-80℃。在后续标记实验前，需用

500 μg/mL的缩合液进行活化。

3. 染料工作液用量计算
Cy5.5染料的使用量根据标记蛋白的量决定。Cy5.5染料与蛋白的最佳摩尔比约为10。

示例：需标记500μL、2 mg/mL的 IgG（MW = 150,000）。假设用100 μL DMSO 溶解1 mg CY染料，则计算如下：

IgG (mmol) = IgG (mg/mL) ×IgG (mL) / IgG (MW) =2 mg/mL×0.5 mL / 150000 mg/mmol= 6.7×10^6 mmol

Cy5.5 (mmol) = IgG (mmol) ×10 =6.7×10^6 mmol×10 = 6.7×10^5 mmol

Cy5.5 (μL) = Cy5.5 (mmol)×Cy5.5 (MW)/mg/Cy5.5 (μL) = 6.7×10^5 mmol× 917.06 g/mol / 0.01 mg/μL
标记反应

按计算量取用新鲜配制的 10 mM的 Cy5.5 染料母液（约10 μL）并加入50 μL 500 μg/mL 缩合液进行活化。将此混合液缓慢加入 0.5 mL 蛋白样品溶液中，轻轻混匀并短暂离心，使样品沉至反应管底部。避免剧烈摇晃，以免蛋白变性或失活。

将反应管置于避光环境下，在室温条件下轻轻摇晃孵育 60 分钟。每隔10-15分钟，轻轻翻转反应管数次，以确保充分混合，提高标记效率。

以上信息均来源于已发表文献，具体实验方案请根据实际研究需求进行适当调整。

二、体内活性：

方法：将 Cy5.5-FFRck-fVIIa 和 Cy5.5 染料单独静脉注射 (i.v.) 到右侧带有表达 TF的 ASPC-1 和不表达 TF 的 MiaPaCa 胰腺肿瘤异种移植瘤的无胸腺裸鼠 (nu/nu) 中，并测试结合的持续时间和稳定性，以便能够跟踪治疗反应。
结果：从第1天到第26 天，在 ASPC-1和 MiaPaCa肿瘤中均观察到胰腺肿瘤异种移植中的 VEC中 Cy5.5-FFRck-fVIIa 与TF的特定定位，而单独未结合的Cy5.5没有观察到特定定位。

溶液配制表： （溶剂DMSO）

本产品仅用于生命科学研究，不得用于医学诊断及其他用途！