ER-Tracker Blue-White DPX, for live-cell imaging 内质网蓝色色荧光探针（活细胞成像用）

产品简介：

ER-Tracker dyes是一系列细胞膜渗透性的活细胞染料，高度选择性结合内质网（ER）。不同于传统的内质网染料DiOC6(3)，该系列染料极少染色线粒体，且低浓度下染色无细胞毒性。使用提供的优化步骤对细胞染色和甲醛处理后，可以保留部分的活细胞染色特征。

ER-Tracker Blue-White DPX是Dapoxyl (DPX)染料家族的成员之一，这类染料具有长发射波长，高吸光系数，高量子产量和宽广的斯托克频移特征。这类染料属于环境敏感型的探针，随着溶剂极性的增加，最大荧光迁移到更长的波长，伴随着光量子产量降低。

本品为DMSO储存液，浓度为1mM。用于活细胞内质网染色，建议工作浓度为100nM-1µM，需根据实际情况做优化调整。

保存条件: 

-20℃避光干燥保存，至少六个月有效，避免反复冻融。

产品特性：

1）分子式：C26H21F5N4O4S

2）分子量：580.5283

3）外观：黄色液体

4）Ex/Em：374/430-640nm (in methanol)

5）检测滤片：DAPI or UV longpass

6)    化学结构图：

产品使用：

以下实验方案是根据牛肺动脉内皮细胞（BPAE）优化所得，且已验证适用于其他常规细胞系的染色。建议以下步骤仅作起始实验的参考，请根据具体的细胞类型和实际情况来优化标记条件。

1. 试剂准备

ER-Tracker Blue-White DPX以1mM的DMSO储存液形式提供，使用前请将ER-Tracker Blue-White DPX 从冰箱内取出，确保回温至室温后，经短暂离心将所有溶液沉到管底。

2. 细胞染色

(1) 制备染色工作液：

将1mM ER-Tracker Blue-White DPX稀释至工作浓度，建议工作浓度100nM-1µM。为了最小化染料过高引起的假象，建议使用能达到实验目的的最低浓度来完成染色。【注意】：在含Ca2+/Mg2+ 的Hank’s 平衡盐溶液（HBSS/Ca/Mg, Cat# MS3501-500ML）内进行染色可得到最佳结果。

(2) 细胞染色：

对于贴壁细胞，吸除培养基，用HBSS清洗细胞，加入预热的染料工作液，37℃孵育15-30min。吸除染色液，加入不含探针的新鲜培养基，并在荧光显微镜下观察细胞。如果细胞需要固定，请跳转到步骤3。

3. 细胞固定及透化

(1) 固定和透化细胞：

用4%甲醛于37℃固定细胞10-20min。ER-Tracker Blue-White DPX染色信号在甲醛固定后仅能部分保留下来。如果还需要做其他染色，细胞需用0.2% TritonX-100 透化处理10min。

(2) 清洗和观察细胞：

细胞固定后，用合适缓冲液清洗2次，每次5min。之后荧光显微镜下观察。

注意事项：

1.      荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

2.      由于ER-Tracker Blue-White DPX是环境敏感型探针，会产生波动较大的发射吸收峰，在430-640nm之间出现。长通DAPI滤光片观察效果最理想。

3.      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

本产品仅用于生命科学研究，不得用于医学诊断及其他用途！

相关产品：