植物基因组DNA提取试剂盒（离心柱法）

产品介绍 

本试剂盒采用DNA吸附柱和新型独特的缓冲液系统，适用于从含酚类、多糖类和酶抑制物的植物样本中快速简单地提取基因组DNA。离心吸附 柱中采用的硅基质材料为新型材料，高效、专一吸附DNA，可有效去除杂质蛋白。提取过程不需要用到有毒的酚氯仿等有毒化学品，提取的基因 组DNA完整性好，纯度高，质量稳定可靠。纯化的DNA可直接用于酶切、PCR、文库构建、Sourthern杂交等实验。

注意事项

1 使用前检查各组分是否出现沉淀。若有，请轻轻摇晃混合均匀，或37℃水浴重新溶解。 

2 使用前请将DTT全部加入到裂解液 PA中去，并置于4℃保存，保质期6个月。 

3 RNase(20mg/ml) 请置于-20℃保存。 

4 沉淀缓冲液使用前请放置冰上预冷。

5 洗涤液I和洗涤液II使用前请按标签提示加入无水乙醇，混合均匀，并在瓶子上做好标记。 

6结合液为异丙醇，请自备。

使用流程

样本预处理

1 称取新鲜植物组织样本100mg或干重组织约30mg（种子样本建议起始用量10 mg），加入液氮，充分研磨成粉末。 

2 迅速将研磨好的样本加入预先装有350 μl裂解液 PA的离心管中（请先检查是否加入DTT），用枪头吹打混匀后，依次加入40 μl RNase (20mg/ml) 、50 μl裂解液PB，涡旋混匀，65℃孵育10-30 min。 

3 向上一步离心管中加入130 μl沉淀缓冲液，震荡混匀，直至出现沉淀。

4 12,000 rpm（~13,400×g），离心5min，小心将全部上清转移到新的离心管中。

DNA提取

1 向样本预处理步骤4的离心管中加入与上清等体积的异丙醇，混匀，全部转移到吸附柱AP20中（吸附柱放入收集管中），12,000rpm（~13,400×g）离 心1 min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱AP20重新放入收集管中。

2 向吸附柱AP20中加入600μl洗涤液 I（请先检查是否加入无水乙醇），12,000rpm（~13,400×g）离心1min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱AP20重新放入收集管中。

3 向吸附柱AP20中加入600μl 洗涤液 II（请先检查是否加入无水乙醇），12,000rpm（~13,400×g）离心1min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱AP 20放入收集管中。

4 重复操作步骤3。

5 将吸附柱AP20放入收集管中，12,000rpm（~13,400×g）离心2min，目的是将吸附柱中残余的洗涤液 II去除，将吸附柱AP20置于室 温放置数分钟，彻底晾干，以防止洗涤液 II中残留的乙醇影响下一步实验。

6 将吸附柱AP20置于一个干净的离心管中，向吸附柱膜的中间部位滴加50-100μl洗脱液，室温放置2min，12,000rpm（~13,400×g）离 心2min将产物收集到离心管中，即为植物基因组DNA，如不立即进行下游实验，于-20℃保存备用。