Anti His Antibody-HRP抗体

产品介绍 

His 标签肽段一般是由6个或者8个组氨酸组成，它可以连接在融合蛋白的N端或者C端，其分子量较小，并且较容易分离和纯化，是目前标 签系统中使用最为广泛的一种。抗His标签的抗体能对His标签融合蛋白进行准确的检测和纯化，通过一定的工艺将辣根过氧化物酶(HRP) 偶联至His标签抗体上，进行WB实验时加入发光液A和B，一般是鲁米诺和过氧化氢，在辣根过氧化物酶(HRP)的催化作用下，鲁米诺与过 氧化氢反应生成一种过氧化物，过氧化物不稳定随即分解，形成一种能发光的电子激发中间体，当后者由激发态返回至基态，就会产生荧光， 实现对His标签融合蛋白的快速检测。

基本信息 

抗体来源：重组抗体 

交叉反应：His标签融合蛋白 

克隆类型：单克隆抗体 

偶联物：辣根过氧化物酶(HRP) 

纯化方式：rProtein A亲和纯化 

储存缓冲液：1×PBS (pH7.4) ，0.05% proclin300，50%甘油 

产品应用 

WB=1:30000-1:100000 

ELISA=1:5000-1:10000

注意事项 

1)本产品为HRP直标抗体，需要避光保存于-20℃或者-80℃中； 

2)本产品灵敏度高，WB稀释比值请按照说明书进行，否则可能会出现非特异性条带； 

3) NC膜或者PVDF膜在转膜前需要用甲醇激活，转膜后抗体稀释液尽量过量，转膜和抗体孵育过程中不要产生气泡； 

4)本品在37℃下孵育30min-60min即可产生很明显的信号，常温孵育可适当延长时间。

参考信息 

1) 表达系统：293细胞分泌表达; 

2) 蛋白信息：带有His标签的重组蛋白，大小≈42KDa； 

3) 上样顺序：1为约含有10ng目的蛋白的培养基原样，2为10ng纯化后的目的蛋白，3为牛血清白蛋白(BSA)； 

4) 抗体稀释液体积：10ml； 

5) 抗体孵育条件：37℃摇晃孵育30min; 

6) 显色：ECL进行显色; 

7) 结论：Anti His Antibody-HRP 按照 1:10000，1:30000 和1:100000稀释后（抗体稀释体积10ml）37℃摇晃孵育30min，能够看到很 明显的信号，目的条带位置在42KDa，随着稀释比值的增大，信号值会有下降，我们推荐客户使用1:30000的梯度进行抗体稀释。

储存条件

干冰运输，-20℃可保存2年，避免反复冻融。