Human DiI-LDL (Human DiI-Low Density Lipoprotein)

红色荧光标记人源低密度脂蛋白

搜索关键词：

HDL；LDL；DiI-LDL；氧化修饰Ox-LDL；乙酰化修饰Ac-LDL；LDL receptor LDL受体；Cholesterol胆固醇；Cholesteryl ester (CE)胆固醇酯 ；Triglyceride (TG)甘油三酯；Cardiovascular diseases心血管疾病；Atherosclerosis (AS)动脉粥样硬化； 

产品简介：

Human DiI-LDL (Human DiI-Low Density Lipoprotein)红色荧光标记人源低密度脂蛋白

想了解更多脂蛋白产品的背景知识，可见NoninBio整理的技术文章：脂蛋白类型与作用机理。

想了解更多脂蛋白产品，可见NoninBio整理的产品专题：脂蛋白产品专题。

产品订购：

温馨提示：由于脂蛋白的保存周期比较短，约6周。本司一般都是接到订单后再生产，从而保证客户拿到最长效期的产品。所以，我们货期至少要2天以上。

基本描述：

低密度脂蛋白（Low Density Lipoprotein，简称为LDL）是血液中五种常见脂蛋白之一，由极低密度脂蛋白（VLDL）通过脂蛋白脂肪酶（LPL）的作用使其丧失部分甘油三酯转化而来。LDL是主要的胆固醇和胆固醇酯转运体，占血浆脂蛋白总量的一半以上。LDL通过受体介导的内吞作用被肝脏和其他组织吸收。LDL受体的胞浆结构域促进衣被小窝（膜上富集受体区域）的形成，而受体的配基结构域可识别LDL的apo-B100，进而引起披网格蛋白小泡产生。ATP依赖的质子泵降低小泡内环境pH，引起LDL与受体解离，一旦丧失连接到溶酶体的披网格蛋白小泡，导致多肽和胆固醇酯的酶水解发生。之后LDL受体重新循环到细胞膜。研究显示胰岛素、三碘甲状腺原氨酸（T3）和地塞米松都能参与调控LDL受体介导的内吞。LDL作为一个大蛋白（Mw 3500kDa），直径25.8nm，由约20-25%蛋白和75-80%脂质构成。其中脂质部分由9%游离胆固醇、62%胆固醇酯、20-24%磷脂和5%甘油三酯组成。

本品是红色荧光探针DiI（1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethyl-indocarbocyanine perchlorate）标记的人源LDL（Human LDL），用来观察培养细胞的LDL结合位点，或筛选LDL受体表达缺陷型的细胞突变株。也可通过流式细胞术评估细胞受体水平或检测组织的受体水平。DiI-LDL是细胞内吞研究的极好标记物。通过纳米颗粒的片段穿透进入细胞膜，用来分离和培养脐带血来源的造血干细胞。也能将脂肪和胆固醇通过血液流动运输到全身。本品为无菌包装，可用PBS磷酸盐缓冲液或细胞培养基直接稀释使用即可。

产品特性：

1. 浓度：0.8-4.0 mg/ml
2. 外观：乳状液体
3. 缓冲液组分：PBS（不含EDTA），pH 7.4

4. 吸光度比例：Dil/Protein=555nm/275nm=1.30

保存与运输方法：

保存：2-8℃避光保存，6周有效。不可冻存！操作时注意无菌操作！

运输：冰袋运输。

注意事项：

1. 本品的稀释工作液极不稳定，建议现配现用； 

2. 本品长期贮存可能会有沉淀析出，属于正常现象，低速离心2 min去除沉淀后使用即可；

3. LDL与LDL受体的结合需要Ca2+和Mn2+的参与，过量EDTA的存在会抑制其结合；

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作步骤：

1. 无菌条件下，将Human DiI-LDL用细胞培养基稀释至20-40 µg/ml。

2. 加入活细胞内，37℃培养3-6小时。

3. 孵育结束，吸去含Human DiI-LDL的培养基，并用无探针的培养基洗几次。

4. 根据实验需求用荧光显微镜或流式细胞仪检测。

a）荧光显微镜观察

采用标准的罗丹明激发：发射滤光片（或建议使用波长为：Ex/Em=549nm/565nm）；若需要请使用含3%甲醛的PBS进行固定，切勿使用甲醇或丙酮固定，因Dil易溶于有机溶剂。【注】需设阳性细胞以做对照。

b）流式细胞分选

胰蛋白酶处理细胞或者加入EDTA制成单细胞悬液，选用合适的已标记纯化细胞用作阴性和阳性对照，从而进行流式分选设门（gate）。（建议使用波长为Ex：488/514/549nm；Em：565nm）。

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注意事项：

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。