专注外泌体研究，外泌体提取专家，专注外泌体提取试剂盒

一、外泌体提取试剂盒：

外泌体（Exosome）是由细胞分泌的包含RNA和蛋白质的小囊泡（30-150 nm），在血液、唾液、尿液及乳汁等体液中大量存在。外泌体被认为具有细胞间信使的功能，在特定细胞之间传递它们的效应物或信号分子；然而其构造、效应物组成以及所参与的生物学通路目前尚不明晰。

外泌体的生物学功能研究中需要分离完整的外泌体颗粒，而传统超速离心方法步骤繁琐、硬件要求高、操作难度大。由本公司自主开发的外泌体快速提取试剂，组分经过优化处理，适用于细胞培养上清液中的外泌体提取，可快速高效地获得外泌体颗粒，可用于电镜分析、NTA粒径分析、核酸分析、蛋白分析、细胞学实验和动物实验等。

外泌体提取的不同方法：

沉淀法：

柱纯法：

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二、高纯度外泌体：

随着应用型客户对于外泌体纯度要求的提高，本公司开发了大规模外泌体分离纯化工艺，通过数十项质量控制和质量检查，形成了高纯度外泌体产品，直径在30~200nm，可作为科研试剂用于透射电镜分析、NTA粒径分析、核酸蛋白分析、细胞学及动物学实验等。包括293T外泌体，牛奶外泌体，干细胞外泌体，植物外泌体，以及定制化工程外泌体等等。

a)     293T外泌体是293T无血清培养细胞上清液中分离提取获得的高纯度外泌体颗粒。

b)     牛奶外泌体是从新鲜的牛奶中分离提纯获得，富含与细胞膜相同的磷脂双分子层薄膜结构，紧密包裹细胞因子、生长因子等特异蛋白质、脂质、miRNADNA片段，可迅速打通细胞生物膜输屏障精准识别、定位细胞损伤等。

c)      MSC细胞外泌体是无血清培养人脐带间充质干细胞上清液中分离提取获得的高纯度外泌体颗粒。

d)     植物外泌体(姜黄)是姜黄汁液清液中分离提取获得的高纯度外泌体颗粒。

e)     植物外泌体(葡萄)是葡萄汁液清液中分离提取获得的高纯度外泌体颗粒。

产品质控：

                                                   细胞外泌体生产工艺流程图                                                   牛奶外泌体生产工艺流程图

外泌体电镜图

外泌体NTA检测图

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三、外泌体获取：

a)   去外泌体胎牛血清由无菌采集的健康胎牛血清过滤而成，去除≥99%的胎牛血清内源外泌体，并与处理前的胎牛血清具相同的细胞生长速率和形态。

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b)    外泌体专用培养基是一款专门用于外泌体的培养基。产品含有HEPES，L-Glutamine, Pharm Grade Albumin, Hypoxanthine, Thymidine, Phenol Red, Glucose. 无动物源Xeno-free, Serum-free.不含生长因子（Growth factors），细胞培养过程中无需添加血清即可达到完全培养基的培养状态，有利于外泌体的收获。

产品质控：

c)     外泌体专用间充质干细胞培养基（Mesenchymal Stem Cell, MSC）培养基及添加剂是一套适用于MSC细胞的无血清、化学成分限定的培养基，专门用于该类细胞外泌体的制备与生产。细胞培养过程中无需添加血清或血小板裂解物，减少外源颗粒的干扰，促进MSC细胞分泌外泌体。

d)    外泌体专用293无血清培养基是适用于HEK293 细胞培养的无血清、化学成分限定的培养基，专门用于HEK293细胞外泌体的研发与生产。细胞培养过程中无需添加血清，与配套补料搭配使用能够促进 293 细胞大量分泌外泌体，较常规 HEK293细胞培养基可提高产量5~10 倍。

产品质控：

e)   外泌体专用293无血清培养基补料与外泌体专用293无血清培养基配合使用，能够提高HEK293细胞活率与密度，提高外泌体分泌量。

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四、外泌体研究常用试剂：

a)     DiR是一种亲脂性的近红外荧光花青染料。其两个18-碳链可以与细胞膜或亲脂性生物分子结合，从而进行特定、稳定的染色。DiR所发射的红外光可以高效地穿过细胞和组织，所以常用于活体成像和示踪。

b)     PKH26外泌体红色荧光标记染料能将带有较长脂质尾巴的黄色-橙色荧光染料（PKH26）结合到细胞膜脂质区域上，是一种亲脂性的红色荧光膜染料。能增加染色效率，同时维持细胞活力，可用于外泌体的标记染色实验，监测细胞示踪。

c)      PKH67外泌体绿色荧光标记染料能结合到细胞膜脂质区域上，是一种亲脂性的绿色荧光膜染料。能增加染色效率，同时维持细胞活力，可用于外泌体的标记染色实验，监测细胞示踪。

d)     Acoerela 的 Aco-600属于水溶性、跨膜的共轭寡电解质（COEs）。这类亲脂性染料具备独特性能，能够完全嵌入目标膜的脂质双层，从根源上最大程度减少染料从目标中“泄漏”的情况发生。 在荧光特性方面，Aco-600 只有在与目标膜结合时， 才会呈现出显著的荧光增强效果。同时，Aco-600 具有极高的水溶性，溶解在水性缓冲液时，既不会形成胶束，也不会产生纳米颗粒。这一特性使其在纳米流式分析以及细胞摄取实验中，能够有效规避假阳性结果的出现，确保实验数据的准确性与可靠性。

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